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液相色谱的特点和维护方法

时间: 2019-01-05 10:38 浏览次数: 来源:赛默飞世尔液质联用
  液相色谱的使用具有非常多的优势,使用效率比较的高,检测的灵活性比较的大,工作中分离的速度也比较的快等特点。 现在小编要为大家介绍的就是液相色谱的使用特点及维护方法有哪些。
  液相色谱(HPLC)是上个世纪60年代发展起来的科学分离技术,是21世纪也就是现在的分离测定的重要手段,自从上个世界分离手段问世以来,因为它具有分离快,效率高,检测灵敏度好的特点。
 
  能够分析沸点高但是不能气化的活性物质所以被广泛应用与生物科技,液相色谱是用高压输液泵将不同极性的单一溶剂或者混合溶剂,缓冲液等流动相泵入装有固定相的液相色谱柱里面。再来经过阀注射待测样品,等待流动相把它带人柱管里面。在柱管里面每个成分被分离之后进入检测器。
 
  色谱信号是根据记录仪,积分仪等信号来记录色谱工作。在使用高效液相色谱仪的时候,保持色谱柱的柱效,柱温,样品物质等,是延长色谱柱使用寿命的重要办法。所以对是非常关键的。
 
  1 色谱柱常用的类型常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶、离子交换树脂、凝胶或玻璃微球等填充剂。在化学键合硅胶中以十六烷基硅烷键合硅胶常用,辛基硅烷键合硅胶次之, 氰基或氨基键合硅胶也有使用。近年来,由于蛋白质等生物大分子物质分离提纯技术的飞速发展,离子交换色谱柱、凝胶色谱柱的应用也越来越广。
 
  2 哪些因素影响色谱柱的使用寿命流动相?在以水溶液为流动相时,水溶液中的微生物例如细菌容易生长,当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时,一些霉菌可能在色谱柱中滋生,堵塞固定相颗粒间的空隙。
 
  由于湿法填充技术的问世,目前普遍使用的色谱柱填料直径一般都小于10um,流动相中的颗粒杂质很容易先沉积在柱头然后慢慢堵塞柱子。流动相的pH值对色谱 柱也有影响,特别是对化学键合硅胶填料,水溶液的pH范围在2~7.5之间,当pH>8时,硅胶会释出生成絮状物堵塞柱子,且难以复原,柱效很快降低,甚至完全失效。
 
  当在缓冲液中加入有机溶剂例如甲醇或乙腈时,盐类的溶解度下降,会析出盐沉淀,堵塞柱子。同时流动相中的有机溶剂和盐会腐蚀色谱柱 头的筛板,产生柱头凹陷。流动相的极性对柱子也有一定影响,对于硅胶柱,甲醇、水、冰乙酸等极性较大物质会破坏填料,反之,对于化学键合硅胶,极性小的物 质如正丁醇、二氯甲烷等也起同样的作用。
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